PCR SAILISEGERSZER TRORSHORING: E masani ona fesiligia fesili ma fofo

Polymerase filifili tali (PCR) auiliiliina o meafaigaluega taua i le Molecular Biology, faʻatagaina tagata e faʻapopoina le DNA o loʻo amata mai i Genera suʻesuʻega. Peitaʻi, pei o se masini faigata, o le PC auiliiliga e mafai ona faʻamalieina faʻafitauli e aafia ai lona faʻatinoga. O lenei tala o loʻo faʻailoa mai ai nisi fesili masaniPCR auiliiligaTaaloga ma saunia ni fofo aoga i faafitauli masani.

1. Aisea e le o le faitioga a laʻu PCR?

O se tasi o faʻafitauli sili ona masani na feagai ma tagata faʻaaoga o le le mafai ona mafai ona faʻaaoga le PCR o le PCR o le AMPLICTOCKACKICT LE DNA. E mafai ona mafua mai i le tele o mea:

E le saʻo le ata faʻapitoa: ia mautinoa o au mea taua e faʻapitoa mo le tau faʻamoemoe ma maua se sili ona lelei lilting vevela (tm). Faʻaaoga ni mea faigaluega a polokalama mo le Primer Design e aloese ai mai le Nonspectic fusia.

Le lava le le lava o le devled DNA: Ia faʻamaonia o loʻo e faʻaaogaina se aofaiga o le faʻaosoina o le DNA. O le mea laititi o le a mafua ai ona vaivai pe leai foi se tala.

Infagators i le faʻataʻitaʻiga: o vailaʻau i totonu o le faʻataʻitaʻiga e mafai ona taofia le PCR tali. Mafaufau e faʻamamaina lau DNA pe faʻaaoga se auala e sili atu ai le faʻaopoopoina o metotia.

MULIMULI: Siaki lau ata muamua, faʻaopopo ai le faʻataʻitaʻiga o le mafaufau, ma ia mautinoa o loʻo le aofia ai lau faʻataʻitaʻiga.

2. Aisea ua fai ai lau PCR oloa le sese tele?

Afai o lau PCR Oloa tele e le o fuafua e pei ona fuafuaina, e ono faʻailoa mai ai se faʻafitauli i le tali atu i tulaga poʻo mea e faʻaaogaina.

Le-faʻapitoa faʻasalalauga: E mafai ona tupu lenei mea pe a fai o se Primer Pows i se nofoaga e leʻi fuafuaina. Siaki le mea faʻapitoa o le muamua o loʻo faʻaaogaina se mea faigaluega e pei o le pa.

E le saʻo le vevela o le vevela: Afai o le vevela o le vevela e maualalo tele, e le faʻatagaina le faamaualuga e ono tulaʻi mai. Optimemization o le vevela o le vevela i le cyden pcr.

MULIMULI: Faʻamaonia primer faʻapitoa ma sili atu le lelei o le vevela le vevela e faʻaleleia ai le saʻo o le PCR oloa.

3. O laʻu pcr auiliiliga faʻaalia se feʻau sese. o le a se mea oute faia?

O feʻau sese i luga o le PCR SPRINGERSZER e mafai ona popole, ae e masani ona latou tuuina atu faʻamatalaga i faʻafitauli tau mafuaʻaga.

O faʻamatalaga o loʻo i ai: ia mautinoa o le PCR SIMBERSZER e faʻaaogaina saʻo. E masani ona faʻaaoga e le aunoa o le tausiga ma le tuʻufaʻatasia o siaki siaki e mauaina ai le mauaina o iʻuga saʻo.

Polokalama Polokalama: O nisi taimi, o le, polokalama bugs e mafai ona mafua ai faafitauli. Toe amata lau komepiuta ma siaki mo polokalame faafouina.

Fofo: Faasino i le tagata faʻaaoga tusi lesona mo le faʻapitoa faʻapitoa code ma mulimuli i le fautuaina faʻafitauli laasaga. Tausisi masani e mafai ona puipuia le tele o faafitauli.

4. Aisea e le o iai lau tali o laʻu PCR

E le mafai ona le fiafia PCR e mafai ona le fiafia i le tele o mafuaaga:

Reagent uiga: Ia mautinoa o toe sapai uma, e aofia ai enzymes, buffers, ma denps, fou ma maualuga uiga. Ua muta pe ua le lelei le uafu

O le karmlel cycler calibration: e le mafai ona afaina ai le vevela o le vevela. Ia siaki e le aunoa le Calibration o le Hormal Cycler.

Fofo: Faʻaaoga le maualuga-lelei toe masani ma calibrate lau hermal cycler e masani ona mautinoa ai ni iʻuga.

5. Faʻafefea ona faʻaleleia le faʻagaioiga PCR

Faʻaleleia atili ai o le faʻatinoina o le faʻamasinoga faʻalavelave e mafai ona oʻo atu ai i ni faʻamatalaga maualuga ma sili atu faʻatuatuaina iʻuga.

Faʻapipiiina mea e faʻatatau i aiaiga: faʻataʻitaʻiga faʻaaogaina eseese o mataupu o Pricers, Talisapaia DNA ma MGCL2. Taitasi tali ole PCR e ono manaʻomia tulaga ese mo le lelei faʻatinoga.

Faʻaoga le maualuga-faʻamaoni enzymes: Afai e taua le saʻo, mafaufau e faʻaaoga se maualuga-faʻamaoni dna polymerase e faʻaititia ai mea sese.

Fofo: faia se mea sili ona lelei faʻataʻitaʻiga e maua ai tulaga sili ona lelei mo lau faʻapitoa pcr seti.

I Aotelega

Troubleshooting aPCR auiliiligaE mafai ona avea o se galuega taufaʻamataʻu, ae malamalama i faʻafitauli masani ma a latou fofo e mafai ona faʻalauteleina tele lau PCR poto masani. E ala i le foia o nei faʻafitauli masani, e mafai ona faʻaleleia e tagata e taofia le PCR e faʻatatau i faʻaiuga i le Molecular BIoty Action. Tautinoga masani, faʻaeteete filifiliga o nofomau, ma sili atu le lelei o tuʻutuʻuga o ki i le manuia PCR SCR.