Su'ega PCR Fa'afitauli: Fesili Fai soo ma Fofo

Polymerase chain reaction (PCR) su'esu'e o meafaigaluega taua i le biology mole, e mafai ai e tagata su'esu'e ona fa'alautele le DNA mo fa'aoga e amata mai i su'esu'ega fa'atutu i su'esu'ega fa'afoma'i. Ae ui i lea, pei o soʻo se masini lavelave, e mafai e le PCR analyzer ona feagai ma faʻafitauli e aʻafia ai lona faʻatinoga. O lenei tusiga e talanoaina ai nisi o fesili masani e uiga iSu'esu'e PCRfa'afitauli ma tu'uina atu fofo aoga i fa'afitauli masani.

1. Aisea e le fa'ateleina ai la'u tali PCR?

O se tasi o faʻafitauli sili ona taatele o loʻo feagai ma tagata faʻaoga o le le mafai lea o le tali a le PCR e faʻalautele ai le DNA taulaʻi. E mafai ona mafua lenei mea i ni nai mea:

Le sa'o le mamanu amata: Ia mautinoa o au fa'amatamata e fa'apitoa mo le fa'asologa fa'asologa ma maua le vevela sili ona lelei (Tm). Fa'aoga meafaigaluega fa'akomepiuta mo le mamanu muamua e aloese ai mai le fusifusia e le fa'apitoa.

Le lava Fa'ata'ita'iga DNA: Fa'amautinoa o lo'o e fa'aaogaina se aofa'i o DNA fa'ata'ita'i. O le itiiti lava o le a i'u ai i le vaivai pe leai fo'i se fa'alautele.

Inhibitors i le faʻataʻitaʻiga: O mea faʻaleagaina i le faʻataʻitaʻiga e mafai ona faʻalavelaveina le tali a le PCR. Mafaufau e faʻamamā lau DNA poʻo le faʻaaogaina o se isi auala e aveese ai.

Fofo: Siaki lau mamanu muamua, fa'aopoopo le fa'atonuga o fa'ata'ita'iga, ma ia mautinoa e le o iai ni iniseti i lau fa'ata'ita'iga.

2. Aisea ua sese ai la'u oloa PCR?

Afai e le'o le tele o lau oloa PCR e pei ona fa'amoemoeina, e ono ta'u mai ai se fa'afitauli i tulaga fa'aalia po'o mea e fa'aaogaina.

Fa'aliga e le fa'apitoa: E mafai ona tupu pe a pipi'i se mea muamua i se nofoaga e le'i fa'amoemoeina. Siaki le tulaga faʻapitoa o mea muamua e faʻaaoga ai se meafaigaluega e pei ole BLAST.

Le Sa'o o le Vevela o le Su'ega: Afai e maualalo tele le vevela fa'apipi'i, e ono tula'i mai e le fa'apitoa le fusifusia. Fa'asilisiliina o le vevela fa'afefe e ala i le fa'asolosolo PCR.

Fofo: Fa'amautu le tulaga fa'apitoa ma fa'amalieina le vevela fa'afefe e fa'aleleia atili ai le sa'o o oloa PCR.

3. Ua fa'aalia e la'u su'esu'e PCR se fe'au sese. o le a se mea oute faia?

O faʻamatalaga sese i luga o se suʻesuʻega PCR e mafai ona faʻafefe, ae e masani ona latou tuʻuina atu faʻamatalaga i faʻafitauli e ono tupu.

Fa'ailoga Fa'atatau: Ia mautinoa o lo'o fa'avasega sa'o le su'esu'e PCR. O le tausiga faifaipea ma le siakiina o le fa'avasegaina e taua tele ina ia maua ai fa'ai'uga sa'o.

Vaega o Polokalama: O nisi taimi, e mafai ona fa'atupu fa'afitauli fa'afitauli. Toe amata lau komepiuta ma siaki mo fa'afouga polokalame.

FOFOGA: Vaʻai ile tusi faʻaoga mo le faʻailoga faʻapitoa ma mulimuli i laʻasaga faʻafitauli fautuaina. O le tausiga faifaipea e mafai ona puipuia ai le tele o fa'afitauli.

4. Aisea e le ogatasi ai a'u tali ole PCR?

Ole fa'aletonu ole PCR e mafai ona fa'anoanoa ona o nisi o mafua'aga:

Tulaga Lelei: Faʻamautinoa o mea faʻafoʻi uma, e aofia ai enzymes, paʻu, ma dNTPs, e fou ma maualuga. O vaila'au ua mae'a po'o ua afaina e ono mafua ai le fesuisuiai.

Fa'ata'ita'iga o le Si'osi'omaga: O le fa'aogaina o le vevela e ono a'afia ai le faiga o le PCR. Siaki e le aunoa le fa'avasegaina o le uila vevela.

Fofo: Fa'aaogā mea e sili ona lelei ma fa'avasega lau ta'amilosaga vevela i taimi uma ina ia mautinoa ai fa'ai'uga tumau.

5. Fa'afefea ona fa'aleleia le lelei ole tali atu ole PCR?

O le fa'aleleia atili o le lelei o tali a le PCR e mafai ona o'o atu ai i fua maualuga ma fa'atuatuaina i'uga.

Fa'alelei tulaga fa'aalia: Fa'ata'ita'i le fa'aaogāina o fa'atonuga 'ese'ese o mea fa'amuamua, DNA fa'ata'ita'i ma le MgCl2. O tali ta'itasi PCR atonu e mana'omia ni tulaga tulaga ese mo le fa'atinoga lelei.

Fa'aoga enzymes fa'amaoni maualuga: Afai e taua tele le sa'o, mafaufau e fa'aaoga se DNA polymerase fa'amaoni maualuga e fa'aitiitia ai mea sese i le taimi o le fa'ateleina.

Fofo: Fa'atino se su'ega fa'ata'ita'iga e su'e ai tulaga sili mo lau seti PCR fa'apitoa.

I se aotelega

Fa'afitauli aSu'esu'e PCRe mafai ona avea ma se galuega faigata, ae o le malamalama i faʻafitauli masani ma o latou fofo e mafai ona faʻaleleia atili ai lou poto masani PCR. E ala i le fo'ia o nei fa'afitauli masani, e mafai ai e tagata su'esu'e ona fa'aleleia taunu'uga o le PCR ma fa'amautinoa taunu'uga fa'atuatuaina ile fa'aogaina ole biology mole. O le tausiga faifaipea, filifilia ma le toto'a o reagents, ma le fa'ata'ita'iina o tulaga fa'afoliga o ki ia manuia su'esu'ega PCR.