Taiala Saienisi o le Taumafanafana: Pe a Feiloa'i se Galu Vevela e 40°C ma Fa'ata'ita'iga Molekiula

Ua tumau pea le vevela maualuga i le tele o Saina talu ai nei. I le aso 24 o Iulai, na tuʻuina mai ai e le Shandong Provincial Meteorological Observatory se lapataʻiga samasama mo le vevela maualuga, ma valoia ai le vevela "e pei o le sauna" o le 35-37°C (111-133°F) ma le 80% o le susū mo aso e fa o lumanaʻi i totonu o le atunuʻu. O le vevela i nofoaga e pei o Turpan, Xinjiang, ua latalata i le 48°C (111-133°F). O Wuhan ma Xiaogan, Hubei, o loʻo i lalo o se lapataʻiga moli, ma le vevela e sili atu i le 37°C i nisi o vaega. I lenei vevela tele, o le lalolagi laʻititi i lalo o le fogāeleele o pipettes o loʻo feagai ma ni faʻalavelave e le masani ai—o le mautu o nucleic acids, le gaioiga o enzymes, ma le tulaga faaletino o reagents ua faʻaleagaina filemu uma e le galu vevela.

Ua avea le aveeseina o le nucleic acid ma se tauvaga faasaga i le taimi. A sili atu le vevela i fafo i le 40°C, tusa lava pe o loo ki le ea malulu, e masani ona sili atu le vevela o le laulau taotoga i luga atu o le 28°C. I le taimi nei, o faataitaiga RNA e tuua i fafo e sili atu ma le faaluaina le vave o le pala nai lo le tautotogo ma le tautoulu. I le aveeseina o le magnetic bead, o le buffer solution e faʻatumuina i le lotoifale ona o le faʻavavevaveina o le volatilization o le solvent, ma e faigofie ona faʻaputuina ai tioata. O nei tioata o le a mafua ai ni suiga tetele i le lelei o le pueina o le nucleic acid. O le fesuisuiaʻi o solvents organic e faʻateleina i le taimi e tasi. I le 30°C, o le aofaʻi o le chloroform volatilization e faʻateleina i le 40% pe a faʻatusatusa i le 25°C. I le taimi o le faʻagaioiga, e tatau ona faʻamautinoa o le saoasaoa o le matagi i totonu o le fume hood e 0.5m/s, ma faʻaaoga ni totigilima nitrile e faʻatumauina ai le aoga o le puipuiga.

O faʻataʻitaʻiga PCR e feagai ma faʻalavelave sili atu ona faigata o le vevela. O vailaʻau faʻamaʻi e pei o le Taq enzyme ma le reverse transcriptase e matua maaleale lava i suiga faʻafuaseʻi o le vevela. O le faʻaputuga i luga o puipui o le paipa pe a uma ona aveese mai se pusaaisa -20°C e mafai ona mafua ai le silia ma le 15% o le leiloa o le gaioiga o le enzyme pe afai e ulufale i le faiga o le tali atu. E mafai foi e vailaʻau dNTP ona faʻaalia le faʻaleagaina e mafai ona iloa pe a uma le 5 minute o le faʻaalia i le vevela o le potu (>30°C). E faʻalavelaveina foi le faʻagaioiga o le meafaigaluega e le vevela maualuga. Afai o le vevela o le siosiomaga i le fale suʻesuʻe e >35°C ma e le lava le faʻasaʻolotoina o le vevela o le meafaigaluega PCR (<50 cm mai le puipui), e mafai ona oʻo atu le eseesega o le vevela i totonu i le 0.8°C. O lenei eseesega e mafai ona mafua ai ona paʻu le lelei o le faʻateleina i le pito o se 96-well plate i le silia ma le 40%. E tatau ona faʻamamāina soo faamama o le pefu (o le faʻaputuina o le pefu e faʻaitiitia ai le lelei o le faʻasaʻolotoina o le vevela i le 50%), ma e tatau ona ʻalofia le ea malulu tuusaʻo. E le gata i lea, pe a faia faʻataʻitaʻiga PCR i le po, ʻaloʻese mai le faʻaaogaina o le meafaigaluega PCR o se "pusaʻaisa faʻafuaseʻi" e teu ai faʻataʻitaʻiga. O le teuina i le 4°C mo le sili atu i le 2 itula e mafai ona mafua ai ona fausia le condensation pe a uma ona tapuni le tapuni vevela, ma faʻavaivaia ai le faiga o le tali atu ma ono faʻaleagaina ai vaega uʻamea o le meafaigaluega.

I le feagai ai ma lapataiga faifai pea o le vevela maualuga, e tatau foi i fale suesue molecular ona tatagi le faailoilo. O faataitaiga taua o le RNA e tatau ona teuina i tua o se pusaaisa e -80°C, ma e faatapulaaina le ulufale atu i taimi e vevela tele ai. O le tatalaina o le faitotoa o se pusaaisa e -20°C i le sili atu ma le faalima taimi i le aso o le a faateteleina ai le fesuisuiai o le vevela. O masini e gaosia ai le vevela tele e manaomia ai le itiiti ifo i le 50 cm o le avanoa e faasalalau ai le vevela i itu uma e lua ma itu i tua. E le gata i lea, e fautuaina e toe faatulaga taimi faataitai: 7:00-10:00 AM mo galuega e maaleale i le vevela e pei o le aveeseina o le RNA ma le utaina o le qPCR; 1:00-4:00 PM mo galuega e le o ni faataitaiga e pei o le auiliiliga o faamatalaga. O lenei fuafuaga e mafai ona puipuia lelei ai tumutumuga o le vevela maualuga mai le faalavelaveina o laasaga taua.

O faʻataʻitaʻiga faʻamolekiula i le taimi o le vevela o le tau o se tofotofoga lea o le tomai ma le onosaʻi. I lalo o le la o le taumafanafana e le mapu, atonu ua oʻo i le taimi e tuʻu ai lau pipette ma faʻaopoopo se pusa aisa faʻaopoopo i au faʻataʻitaʻiga ina ia mafai ai e le meafaigaluega ona faʻaitiitia le vevela. O lenei faaaloalo mo suiga o le vevela o le mea sili lea ona taua i le fale suʻesuʻe i masina vevela o le taumafanafana—auā, i le vevela o le taumafanafana e 40°C, e oʻo lava i molekiula e manaʻomia se "vaega polar faʻapitoa" e puipuia ma le faʻaeteete.